一次性培养皿，是微生物分离、纯化、菌落培养实验中使用广泛的基础耗材，由聚苯乙烯材料注塑成型，分为皿底和皿盖两个部分，成品经过辐照灭菌，独立包装，拆封之后可以直接投入实验使用，省去玻璃培养皿清洗、烘干、高压灭菌等一系列繁琐工序，是各类微生物实验室常备物品。
一次性培养皿有多种尺寸规格，常见直径包含60mm、90mm、100mm、150mm，部分型号皿内设置分隔筋，将皿内空间分成2格或者3格，可以在同一个培养皿内接种不同样品，节约耗材。皿体材料透明度较好，皿底平整，没有形变，培养完成之后，不需要拿起培养皿，直接从底部观察菌落形态、大小、颜色。皿盖内侧设计有通气凹槽，盖合之后，内部可以维持微生物生长需要的气体交换，同时减少培养基水分快速蒸发，降低培养过程中培养基干裂概率。皿盖边缘带有凸起围挡，拿取的时候，降低手部触碰皿内区域造成污染的可能性。
一次性培养皿的使用场景覆盖范围很广。食品质检实验室在检测食品中菌落总数、霉菌酵母菌时，会使用一次性培养皿倾倒琼脂培养基，接种样品进行培养。疾控相关实验室开展环境采样、致病菌分离实验，也大量使用这类耗材。高校教学实验室，微生物基础实验课程选用一次性培养皿，减少学生清洗玻璃器皿的工作量，降低器皿清洗不到位带来污染的问题。部分细胞培养相关实验，也会选用适配细胞贴壁生长处理的一次性培养皿。
使用一次性培养皿时，要留意包装状态。外包装破损、包装出现水汽，说明灭菌状态可能失效，不可以继续用于无菌实验。打开包装的操作尽量在洁净操作台内完成，减少环境杂菌落入皿内。倾倒培养基的时候，控制培养基温度，温度过高会破坏部分热敏性营养成分，温度偏低，培养基会提前凝固，无法均匀铺在皿底。接种涂布操作完成之后，静置等待培养基凝固，倒置放入恒温培养箱进行培养，倒置放置可以避免冷凝水滴落到菌落表面，造成菌落蔓延。
一次性培养皿为单次使用设计，实验结束之后按照实验室废弃物规范处理，不回收重复使用。这种使用方式可以规避玻璃器皿反复灭菌带来的破损风险，也消除器皿残留清洁剂干扰微生物生长的问题。不同实验需求，可以挑选对应规格、表面处理类型的一次性培养皿。作为微生物实验最基础载体，一次性培养皿的品质与操作规范，会直接影响菌落生长状态，关系到后续观察与计数结果的稳定性。