扫描型分光光度计使用方法
一、开机前检查
1. 检查仪器电源线、氘灯、钨灯状态,样品室内部无残留液体、杂物,比色皿透光面干净无划痕。
2. 确认波长旋钮/软件参数归零,样品仓关闭。
二、开机预热
1. 接通电源,开启仪器主机、电脑(带扫描功能的紫外‑可见分光光度计多需配套软件)。
2. 光源预热 20‑30 min,氘灯、钨灯达到稳定状态,才可进行波长扫描。
三、参数设置(扫描模式核心步骤)
1. 进入仪器软件面板,选择波长扫描模式(Scan),不要选定量测试模式。
2. 设置扫描波长范围:输入起始波长、终止波长;例:紫外区200‑400nm,可见区400‑800nm。
3. 设置扫描速度:常规选中速;样品峰较窄、需要高精度图谱,选用慢速。
4. 设置狭缝宽度:狭缝越大光强越高,分辨率下降;一般1‑2 nm。
5. 设置采样间隔(数据点步长):步长越小图谱越精细。
6. 选择纵坐标模式:吸光度A、透过率T等。
四、基线校正(空白校准,扫描必不可少)
1. 将参比溶液(空白溶剂)装入洁净比色皿,用滤纸擦干净外壁,放入样品槽。
2. 关闭样品室,执行基线扫描/自动调零。
> 基线校正就是扣除溶剂、比色皿本身的吸收,否则图谱会出现基线漂移、杂峰。
> 扫描波长范围变更后,必须重新做基线。
五、放置待测样品,开始扫描
1. 取出参比,放入装好待测液的比色皿,透光面朝向光路方向。
2. 关闭仓盖,点击开始扫描,仪器自动从起始波长向终止波长逐点采集信号,生成光谱曲线。
3. 扫描过程中不要打开样品室盖子、不要触碰比色皿,避免光线干扰图谱。
六、图谱查看与数据导出
1. 扫描结束后屏幕显示样品全波长吸收光谱图。
2. 可手动读取最大吸收峰波长、吸光度数值;也可利用软件寻峰功能自动标记峰值。
3. 保存光谱图谱文件,导出原始数据,用于后续分析。
七、关机流程
1. 先关闭光源(氘灯可单独关闭延长寿命),再退出软件,关闭主机电源。
2. 取出比色皿,及时清洗晾干;清理样品仓,擦干洒落液体。
3. 盖上防尘罩。
常见注意事项
1. 紫外波段(200‑340 nm)必须使用石英比色皿,玻璃比色皿会吸收紫外光,不可用。
2. 高浓度样品吸光度超过1.0‑1.5时,建议稀释后再扫描,减少图谱失真。
3. 更换溶剂、改变扫描区间,都必须重新跑基线。